【摘 要】
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赭曲霉毒素A (OTA)是一种常见的有毒真菌次级代谢产物,主要由曲霉菌属产生,广泛存在于谷物、谷物产品和饲料中,严重危害人类及牲畜健康.本实验室采用碳二亚胺法将OTA与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联成为完全抗原OTA-BSA和OTA-OVA.OTA-BSA作为免疫原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤融合技术制备单克隆抗体.经筛选,获得了一株可分泌高亲和性抗体的杂交瘤细胞株2D8,亲和
【机 构】
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浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,杭州310058 浙江农林大学动物科技学
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十三次学术交流会
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赭曲霉毒素A (OTA)是一种常见的有毒真菌次级代谢产物,主要由曲霉菌属产生,广泛存在于谷物、谷物产品和饲料中,严重危害人类及牲畜健康.本实验室采用碳二亚胺法将OTA与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联成为完全抗原OTA-BSA和OTA-OVA.OTA-BSA作为免疫原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤融合技术制备单克隆抗体.经筛选,获得了一株可分泌高亲和性抗体的杂交瘤细胞株2D8,亲和常数为3.75×109 L/M.OTA-OVA作为包被抗原,建立间接竞争ELISA检测方法,其半数抑制率(IC50)为7.6 μg/kg,检测限(LOD)为1.4 μg/kg,检测区间(IC20-IC80)为2.4-23.6 μg/kg,且对赭曲霉毒素A有很好的特异性,对玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1、伏马毒素和呕吐毒素等几乎不存在交叉反应性.玉米、小麦和大豆样本中的回收率检测在检测区间内可达91.2-110.3％.采用该方法和商品化ELISA试剂盒,同时对56份天然样本中赭曲霉毒素A含量进行检测,结果显示13份样本呈阳性且两种方法的定量结果线性关系良好.本实验室建立的间接ELISA检测方法可用于多种谷物及饲料样本中赭曲霉毒素A的定量检测与分析.
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