【摘 要】
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手足口病频繁流行于5岁以下儿童,人肠道病毒71型(EV71)是其主要致病原之一,EV71可以分为11个亚基因型(A,B1-B5,C1-C5),因此,理想的EV71疫苗应该可以保护所有亚型的EV71毒株.本文评价了两种展示EV71保守中和表位的嵌合病毒样颗粒作为疫苗的潜力并初步研究了它们发挥保护作用的机制.首先,分别制备了乙肝病毒核心抗原(HBc)与EV71的中和表位SP55和SP70的融合蛋白,命
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手足口病频繁流行于5岁以下儿童,人肠道病毒71型(EV71)是其主要致病原之一,EV71可以分为11个亚基因型(A,B1-B5,C1-C5),因此,理想的EV71疫苗应该可以保护所有亚型的EV71毒株.本文评价了两种展示EV71保守中和表位的嵌合病毒样颗粒作为疫苗的潜力并初步研究了它们发挥保护作用的机制.首先,分别制备了乙肝病毒核心抗原(HBc)与EV71的中和表位SP55和SP70的融合蛋白,命名为HBcSP55和HBcSP70,并证明这两种融合蛋白可以快速高量表达,并成功自组装成将外源表位展示在表面的嵌合病毒样颗粒.免疫小鼠后,两种嵌合病毒样颗粒均可以诱导产生同时针对载体HBc和外源表位的特异性抗体反应.体外中和试验表明,HBcSP55和HBcSP70的小鼠抗血清对EV71都有中和活性,而HBc的抗血清却没有中和活性.体内保护试验证明,通过被动免疫HBcSP55或HBcSP70的抗血清而不是HBc的抗血清可以保护新生小鼠免于致死剂量EV71病毒的感染.一个有趣的发现是,HBcSP70的抗血清可以抑制EV71病毒吸附到靶细胞而HBcSP55的抗血清不可以,然而两种抗血清均能抑制已经吸附到靶细胞上病毒的感染.进一步研究发现,SP55和SP70两种表位特异性抗血清之所以表现出不同的保护效果,并具有不同的中和机制,可能与二者对完整EV71病毒颗粒结合能力的差异有关.综上,本文不仅证明展示SP55和SP70表位的嵌合病毒样颗粒是有希望的广谱抗EV71疫苗待选者,而且揭示了EV71两种表位特异性抗体发挥中和作用的不同机制.
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