PCR-反向点杂交技术用于检测结核分枝杆菌耐药基因突变的研究

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目的为了解绍兴地区结核病患者结核分枝杆菌耐药基因突变及其耐药相关性。方法采用PCR-反向点杂交技术检测125份肺结核痰液标本及检测结核分枝杆菌150株,结核分枝杆菌5种耐药突变基因(rpoB、katG、inhA、embB、rpsL)的13种基因突变模式。结果 275例结核病患者中,对4种抗结核药物均敏感201例(73.1%);单耐药20例(7.2%);多耐药30例(10.9%);耐多药(MDRTB)24例(8.7%)。每种药物的耐药及耐药突变位点,利福平、异烟肼、链霉素和乙胺丁醇的耐药率分别为14.9%、18.5%、10.9%、4.0%,基因突变位点检出总数133,基因突变位点检出率前5位的依次为315M(28.5%)、43M(18.O%)、S531L(15.0%)、15M(9.8%)和H526Y(5.3%)。结论 PCR-反向点杂交技术是一种快速、方便、特异性强、灵敏度高适合于结核分杆菌药敏检测的新技术,可快速检测结核分枝杆菌抗结核药物(利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇)的耐药性,结核分枝杆菌基因突变位点检出率前5位的依次315M、43M、S531L、15M和H526Y,适合临床实验室结核分枝杆菌耐药性的检测。
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