【摘 要】
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为了解我国鸡群感染禽坦布苏病毒的情况，应用已建立的间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)对于2010 年12 月-2013 年9 月近三年内采自福建、江西、浙江、广东四省发生产蛋异常鸡场的开产蛋鸡、后备蛋鸡的血样共2310 份进行禽坦布苏病毒抗体的检测，并对结果进行了分析。
【机 构】
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福建省农科院畜牧兽医研究所,福建 福州,350013
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛
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为了解我国鸡群感染禽坦布苏病毒的情况，应用已建立的间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)对于2010 年12 月-2013 年9 月近三年内采自福建、江西、浙江、广东四省发生产蛋异常鸡场的开产蛋鸡、后备蛋鸡的血样共2310 份进行禽坦布苏病毒抗体的检测，并对结果进行了分析。
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根据大肠杆菌密码子使用频率,我们首先对IBD强毒分离株VP2基因进行改造并合成,命名为mVP2,然后选用含温度诱导型启动子PR PL的原核表达载体pBV220和融合表达型原核表达载体pET-32a,构建含密码子优化型IBDV VP2基因的原核表达质粒pET32- VP2和pBV220-VP2,收集诱导菌体。
以传染性法氏囊病病毒(IBDV)病毒样颗粒(VLP)重组VP2蛋白免疫BALB/c小鼠，制备了七株分泌抗IBDV单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞。
为研究原核表达的重组鸡α干扰素/白细胞介素-2 融合蛋白(rChIFN-α-Linker-ChIL-2,重组融合蛋白)在SPF 鸡体内的抗病毒作用,本研究将传染性法氏囊病病毒(IBDV)强毒株和rChIFN-α-Linker-ChIL-2 融合蛋白同时接种21 日龄SPF 鸡,并分别通过临床观察和攻毒后(dpc)不同时间IBDV 排毒率、带毒时间、在不同组织器官的动态分布及其体液和细胞免疫指标的检
为了评价重组鸡白细胞介素-6(rChIL-6)蛋白在鸡体内的免疫增强作用机理，本研究将40 只7 日龄健康SPF 鸡随机平均分为4 组以进行rChIL-6 蛋白对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)灭活疫苗免疫增强作用试验，于14 日龄时进行免疫接种和rChIL-6 蛋白注射。
为研究鸭坦布苏病毒(DTMUV)E蛋白的免疫原性,本试验构建了表达质粒pET32a-E,表达的E蛋白大小约为48KD,Western-blot 分析表明该蛋白能与DTMUV阳性血清产生特异性反应。
根据鹅坦布苏病毒JS804 株非结构蛋白NS1 基因序列,设计一对特异性引物,利用PCR 方法扩增得到完整的NS1 基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a 和pET32a 上,构建出重组表达质粒pET28a-NS1和pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中,经IPTG 诱导得到NS1 融合蛋白(His-NS1),其分子质量约分别为44kD 和58kD,均在诱导后6h 达到表达量高峰。
为建立快速检测鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)抗体的血清学方法,以及对鸭坦布苏病毒病进行血清流行病学调查,本研究以原核表达纯化的鸭坦布苏病毒ED3 蛋白为包被抗原,建立了检测鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA 诊断方法。
为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况，本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1 蛋白的基础上，建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA 方法。
本研究以鹅坦布苏病毒(goose Tembusu virus,GTMUV)囊膜蛋白(Envelope,E)基因序列为基础,采用Garnier_Robson 方法、Chou_Farplus 方法和Karplus_Schulz 方法预测了其结构蛋白的二级结构。用Kyte_Doolittle 方法对结构蛋白的亲水性进行了分析,用Emini 方法预测了结构蛋白的表面可能性,以Jameson_Wolf 方法
为建立快速检测鸭坦布苏病毒病抗体的血清学方法本研究利用鹅坦布苏病毒JS804 株非结构蛋白NS1基因序列将其克隆至原核表达载体pET32a 上,建出重组表达pET32a-NSI,转化至BL21(DE3)中。