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目的 细胞迁移是胃肠黏膜损伤修复的重要环节,胃肠黏膜修复是益气健脾中药的重要作用机理之一.本实验观察白术提取物对小肠上皮(IEC-6)细胞迁移过程多胺调控信号通路的作用.方法 白术药材以甲醇超声提取并真空干燥,得到白术提取物干粉(得率10.5%),实验中用PBS配制成所需浓度(以干粉重量计),滤膜过滤后作受试药.细胞接种于6孔板,5%CO2,95%空气,饱和湿度下37℃C培养24h,划痕法造细胞迁移模型;加入各受试药和完全培养基,阳性对照药加精脒5μmol/L;加受试药培养12h后,柱前衍生高效液相色谱法测细胞内多胺(腐胺,精脒,精胺)含量;加受试药培养24h后,流式细胞仪检测细胞膜电位(Em)和细胞内游离钙离子含量([Ca2+].yt);Western Blot法检测钾通道蛋白Kv1.1表达、储存操纵性钙通道蛋白TRPC1表达、与钙离子调控相关的PLC-γ1蛋白表达.结果 白术提取物(100mg/L或200mg/L)对IEC-6细胞有以下作用①能促进细胞迁移;能使多胺合成抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致的细胞迁移抑制恢复正常.②能提高划痕损伤后细胞内多胺(腐胺、精脒以及精胺)含量;能使DFMO所致的多胺含量降低作用恢复正常.③能提高划痕损伤后Kv1.1蛋白表达,能使DFMO所致的Kv1.1蛋白表达抑制作用恢复到正常水平.④能使细胞膜超极化,Em增加;能逆转DFMO所致的细胞膜去极化,使Em的降低恢复到正常水平.⑤能提高划痕损伤后细胞内游离钙离子含量([Ca2+]cyt);并且能使DFMO所致的[Ca2+]cyt下降恢复至正常水平.⑥能提高划痕损伤后TRPCl蛋白表达,能使DFMO所致的TRPC1蛋白表达抑制恢复到正常水平.⑦能提高划痕损伤后PLC-γ1蛋白表达,能使DFMO所致的PLC-γ1蛋白表达抑制恢复到正常水平.白术提取物上述作用与加入外源性精脒相似.结论 白术提取物可通过作用于多胺介导钾通道激活信号通路而促进肠上皮细胞迁移,这可能是益气健脾中药白术胃肠黏膜损伤修复的作用机理之一.