【摘 要】
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建立合适大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinant Human Interferon-α1b,rhIFN-α1b)的纯化工艺.采用高效分泌表达rhIFN-α1b的甲醇酵母工程菌发酵,收集离心后的上清液,经离子交换柱和分子筛柱层析纯化.纯化的rhIFN-α1b的纯度、比活性、活性回收率、相对分子质量和等电点分别为98％以上、2.4×10IU/mg、14％、19000和5.0.经检测
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建立合适大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinant Human Interferon-α1b,rhIFN-α1b)的纯化工艺.采用高效分泌表达rhIFN-α1b的甲醇酵母工程菌发酵,收集离心后的上清液,经离子交换柱和分子筛柱层析纯化.纯化的rhIFN-α1b的纯度、比活性、活性回收率、相对分子质量和等电点分别为98％以上、2.4×10<7>IU/mg、14％、19000和5.0.经检测,rhIFN-α1b蛋白N-端15个氨基酸序列与正常对照完全符合.该纯化工艺简便,时程短,重复性好,适合于大规模生产.
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目的:建立用于大量血浆检测中谷丙转氨酶(ALT)含量测定的方法.方法:在样品:乳酸脱氢酶底物液为30:210,反应温度为37℃的反应条件下,利用线性反应的动力学反应程序.经不同ALT效价的定值血清检验,以340nm处的mOD值为横坐标,血清标本的IFCC效价单位为纵坐标,进行直线回归,选定的程序在0~134IU/L(IFCC单位)范围内线性良好(r=0.993),在此范围内,标准品直接以IFCC效
目的:建立一套等位基因特异性扩增(ASA)的检测体系,用于结核分枝杆菌对利福平耐药性的快速检测.方法:根据结核分枝杆菌野生型基因设计ASA特异性引物,ASA PCR扩增39株结核杆菌利福平耐药株的rpoB基因,琼脂糖凝胶电泳加以检测,进而推断其利福平的耐药性;同时进行DNA序列测定以证实ASA法的检测结果,并分析上海地区结核杆菌rpoB基因的突变特点.结果:ASA法一共检出了39株利福平耐药株中的
目的:利用HCV多表位复合抗原免疫家兔制备高效价抗HCV多克隆抗体.方法:HCV多表位复合抗原免疫家兔获得高效价抗血清,经硫酸铵沉淀Print A/G亲和层析纯化.结果:HCV多表位复合抗原免疫家兔获得效价大于1:16000的高效价抗HCV血清,经硫酸铵沉淀及Print A/G亲和层析纯化后纯度为电泳纯.结论:HCV多表位复合抗原具有较好的免疫原性,其制备的抗体的效价及特异性.
用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化出抗牛血清兔IgG,作为包被抗体和辣根过氧化物酶标记的酶标抗体,建立了检测疫苗中残余牛血清蛋白的ELISA双抗体夹心法.其检测限度可达1.56ng/ml,精密度、准确度和特异性均较理想,用ELISA双抗体夹心法与反向间接血凝法(RPHA)分别检测麻疹、风疹、腮腺炎等病毒性疫苗总计124批以及含有牛血清的各种疫苗基质液24批中的牛血清含量,卡方检验结果表明该法可以满意的用于疫
九十年代末以来,应用低温乙醇法压滤工艺分离人血浆蛋白组分获得成功.经该工艺的白蛋白回收率较离心工艺明显提高,首次入库率27g/L血浆以上;产品质量稳定,符合《中国生物制品规程》要求,铝离子含量<200μg/L.
目的:考察各血浆站所供血浆按规程初检结果的可靠性并作质量分析;此外探讨原料血浆抗-HBS和抗-HCMV抗体的滴度.方法:对所供血浆按《中国生物制品规程》(原料血浆采集规程)允许的方法进行检测.结果:各血站收集的原料血浆虽经初筛合格仍有0.05％不合格;各血站所供血浆中均有较高的抗-HBS和抗-HCMV抗体.结论:各血站所供原料血浆投料前进行二次复检是非常必要的;从中检出高滴度抗-HBS和抗-HCM
应用热乙醇法分离FIV沉淀中白蛋白成功,该方法适用于压滤工艺和离心工艺获得的蛋白沉淀的回收.该方法蛋白回收率高、操作空间小、质量稳定、成本低廉.
目的:为了提高血液制品的病毒安全性,在已有灭活病毒方法的基础上,对冻干后的终品增加一步干热(沸水浴30分钟)灭活以达到进一步灭活脂包膜和非脂包膜病毒的目的.方法:对冻干后的终品进行沸水浴30分钟的加热.结果:沸水浴30分钟可以使指示病毒VSV、Sindbis、HIV的病毒滴度分别降低3~4log以上,盲传三代未出现细胞病变,且经该方法处理的制品除凝血因子效价损失在5％~20％之外,其它内在质量基本
目的:探讨以新鲜冰冻健康人血浆为原料,制备一种性质与功能接近于人血清的标准化产品,并且经过病毒灭活,消除使用血浆所带来的一些相关危险因素,在临床上可以不考虑血型而输给任何患者.方法:采用去除冷沉淀、AEROSIL等固相物质吸附及除脂过滤方法,达到除掉纤维蛋白原及其它凝血因子和不稳定脂蛋白的目的.采用国际上通用的S/D(TNBP/tRITONx-100)处理及巴氏灭活法(60℃,10小时加温)两种不
本文在分析我国及世界范围内流行非典型肺炎病例的基础上,介绍了目前世界各国对非典肺炎病原学的研究现状及我国对冠状病毒的研究情况.