炭疽毒素通过翻译后机制抑制高糖诱导的VEGF过度分泌

来源 :江苏省第十五次眼科学学术会议暨2014中国眼底病论坛——眼底血管疾病诊断治疗进展专题研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tan123456654
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目的:体外观察高糖环境对人视网膜色素上皮细胞(retinal pigmented epithelium,RPE) VEGF分泌的影响以及炭疽致死毒素(LeTx)通过阻断MAPKs通路对VEGF的分泌的影响.方法:体外培养人RPE细胞株,分为N组、H组、L组.N组:细胞培养于含5.6 mM葡萄糖,2.5%小牛血清的DMEM培养液中.H组:细胞培养于含30 mM葡萄糖,2.5%小牛血清的DMEM培养液中.L组:于H组培养液刺激细胞前,首先用10 MEF与100nM LF联合处理细胞24小时;作用不同时间梯度后行细胞计数;抽取总RNA行RT-PCR;收集细胞上清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量测定各组VEGF浓度.通过免疫印迹的方法评估MEK/MAPK通路对VEGF分泌的影响.
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