【摘 要】
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目的观察缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞NF-KB信号通路中二氮嗪对FKN表达的作用方法培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs),以1×106/ml的密度接种于96孔板(100μl/孔)或直径
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目的观察缺氧复氧大鼠心肌微血管内皮细胞NF-KB信号通路中二氮嗪对FKN表达的作用方法培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞(MMECs),以1×106/ml的密度接种于96孔板(100μl/孔)或直径6cm的培养皿(2ml/皿)随机分为4组(n=6):正常对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)、二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(DZ组)、NF-K B特异性阻断剂PDTC+二氮嗪预处理+缺氧/复氧组(PDTC+DZ组)。DZ组加入100μmol/L二氮嗪、PDTC+DZ组在加入100μmol/L二氮嗪前2h先加入100μmol/L PDTC,然后和缺氧复氧组同样进行缺氧2h复氧2h。Annexin V-FITC/PI双染、双标记法测定细胞凋亡率、MTT法测定细胞活力、RT-PCR法检测FKN水平。结果与N组比较,H/R组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)、增殖率显著降低(P<0.01),FKN的表达显著增强(P<0.01);与H/R组比较,DZ组细胞凋亡率显著降低(P<0.01)、增殖率显著升高(P<0.05),FKN的表达显著降低(P<0.01);与DZ组比较,PDTC+DZ组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)、增殖率显著降低(P<0.05),FKN的表达显著增强(P<0.01)。结论mito KATP开放通过NF-κB信号抑制MMECs缺氧复氧损伤和FKN表达增强。
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