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目前确定纳米粒子摩尔浓度的方法，大多需要通过标准样品来计算校准因子或者需要事先测定相关的形貌、光学以及化学性质。我们提出一种无需标准曲线或先验数据直接测定纳米粒子浓度的绝对定量方法。该方法通过使用高速表面等离子体共振显微镜观察单个纳米粒子在界面的吸附过程来绝对定量。溶液中扩散的纳米粒子随机碰撞到吸附界面上并停留在该处，形成半无限扩散系统。结合费克定律和随机行走过程，可以推得理论公式来描述该过程，并通过拟合实验数据，得到绝对浓度。该方法被用于测定球状聚苯乙烯纳米粒子的浓度，取得了满意的定量结果。