目的：对经API细菌鉴定条所证实的眼源性蜡样芽胞杆菌进行HBL基因鉴定并进行体外毒理性试验.方法：根据溶血素结合亚基B、2个溶血亚基L1、L2三种组份的基因核苷酸序列，设计和合成3对特异性引物，通过体系和条件优化，建立PCR检测方法，并对5株临床分离的蜡样芽胞杆菌样本进行检测分析；随机选取其中1株菌，利用盐析法提取溶血素，配成不同浓度且具有活性的HBL作用于绵羊红细胞、Vero细胞和Hela细胞监测其对细胞的毒性；通过腹腔注射观察HBL对小鼠的致死作用，评估其毒力的强弱.结果5株临床分离菌中，全部检出三个基因；蜡样芽孢杆菌溶血素BL蛋白具有较强溶血活性，其溶血活呈明显的时间一剂量依赖性；溶血素BL对Vero细胞和Hela细胞的作用所致的形态变化虽有不同，但结果均会导致细胞死亡，其内容物释出；对小鼠的致死率同样存在时间一剂量依赖性，且2.0 HU/ml浓度以上的溶血素BL可使小鼠48h的致死率达100％ (5/5).结论：蜡样芽胞杆菌溶血素具有较强的溶血活性，较低浓度即可导致细胞及小鼠死亡BL.对临床分离的眼源性蜡样芽胞杆菌BL基因进行检测，三个片段均存在，为感染该菌后病情发展迅速、预后较差的实际提供了理论依据，同时为该病快速诊断和分子流行病学调查提供了新的方法.