【摘 要】
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目的 诱导表达凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)过敏原蛋白Lit v 1.2,并利用6-His标签获得纯化蛋白.方法 用Nde Ⅰ和Pst Ⅰ双酶切实验室前期构建保存的pGEM-T-Lit v 1.2质粒,将目的基因与表达载体pET44a连接,转入表达菌株Rosetta,通过氨苄青霉素(Amp)抗性基因筛选,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得Lit v 1.
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院/广东省过敏反应与免疫重点实验室/呼吸疾病国家重点实验室变态反应研究室 510260
【出 处】
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中华医学会2015年全国变态反应学术会议
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目的 诱导表达凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)过敏原蛋白Lit v 1.2,并利用6-His标签获得纯化蛋白.方法 用Nde Ⅰ和Pst Ⅰ双酶切实验室前期构建保存的pGEM-T-Lit v 1.2质粒,将目的基因与表达载体pET44a连接,转入表达菌株Rosetta,通过氨苄青霉素(Amp)抗性基因筛选,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得Lit v 1.2蛋白.通过亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳检测纯化效果.
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