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RNA干扰是指由双链RNA引发的转录后基因沉默机制,已被广泛应用于基因功能验证、信号转导等方面研究中.本研究通过构建3个表达shRNA的RNAi表达质粒,对可能负调节胰岛素信号通路的猪胍醇磷酸酶SKIP的表达进行抑制.经RT-PCR和westernblotting鉴定,获得了2个能显著降低猪SKIP表达的RNA干扰重组质粒,用其转染猪肾细胞IBRS-2能促进胰岛素信号转导的关键因子Akt的磷酸化,验证了其负调节胰岛素信号的功能。