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目的:研究华东地区6个城市的8所医院获得的39株携带KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌分子流行病学及耐药基因周围环境。方法:采用E试验法测定10种常用抗菌药物的MIC值。利用PCR扩增筛选碳青霉烯酶基因,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行菌株的同源性分析,通过质粒接合实验、质粒提取、Southern杂交研究编码耐药基因的质粒,构建质粒DNA文库、鸟枪法测序测定耐药质粒的基因序列,生物信息学方法分析基冈结构。结果:所有菌株对碳青霉烯类抗生素均表现出耐药或者敏感性降低,PFGE将主要的36株肺炎克雷伯菌分为了6个主要的克隆型,所有菌株携带的KPC-2基因均位于耐药性质粒上.质粒的大小在40~180 kb之间不等。部分质粒可以通过接合作用转移。对其中1株肺炎克雷伯菌所携带的质粒pKP048进行了详细的基因序列测定,获得了KPC-2基因周围总长20.2 kb的序列。结论:携带KPC-2基因耐药菌株已经在国内多家医院流行,该基因位于1个由Tn3转座子和Tn4401转座子共同整合而成的复杂结构上,这种多个转座子整合而成的复杂转移单元很好地揭示了国内KPC-2基因的传播途径以及遗传背景。