双层微流控芯片的构建及在肺腺癌耐药性分析中的应用

来源 :2011中华医学会呼吸病学年会暨第十二次全国呼吸病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maly_soly
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  目的:在微流控芯片系统的培养池内培养人肺腺癌细胞系(SPCA-1),并进行耐药分析,进一步研究MRPI在肺癌耐药中所起的作用。方法:本实验使用微流控芯片系统进行肺癌耐药性分析,此系统装置包括1个两层芯片和3个MS26型微注射器。通过上层芯片进样孔,将浓度为5X 10}/mi的SPCA-1细胞注入下层芯片培养池内,并通过微注射器为细胞培养持续提供新鲜培养基。结果:双层微流控芯片系统能够为细胞培养提供良好的生长环境,并能实现两组细胞间的平行对照实验,微注射器也能够持续为细胞培养提供新鲜培养液。免疫荧光检测显示,细胞经MK-571作用后,实验组细胞MRP1表达量与对照组比较无明显改变,而DOX和Rh-123的胞内荧光密度分别为对照组的2. 15和2. 51倍。化疗药物VP-16作用于细胞后,细胞凋亡率检测显示,经MK-571作用后细胞凋亡率明显高于对照组(38. 2士2.5% versus 12.3士0.85%,p<0.05)。结论:本研究成功实现了在双层芯片上进行细胞培养、蛋白表达量和功能检测以及细胞凋亡检测。同时,我们实现了实验组和对照组细胞在同一芯片上的共培养,并且在芯片上进行两组细胞之间的平行对照试验。MK-571不能抑制SPCA-1细胞MRP1的表达,但能够抑制其外排自身底物的功能。此外,凋亡分析表明,抑制MRP1的功能可以逆转肺癌细胞SPCA-1对化疗药物VP-16的耐药,这对研究肺癌细胞耐药机制具有一定的指导意义,并且为细胞生物学研究提供一种新平台。
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