抑制组蛋白去乙酰化酶活性对鼻黏膜上皮细胞分泌IL-6、IL-8和LL37的影响

来源 :2015年全国鼻科年会暨第七届鼻部感染与变态反应疾病专题学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jonay123
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目的:研究组蛋白去乙酰化酶(HDACs)抑制剂(TSA和SB)对鼻黏膜上皮细胞表达IL-6、IL-8和抗菌肽LL37的影响. 方法:体外培养鼻黏膜上皮细胞,同时培养下呼吸道上皮细胞系NCI-H292细胞作为平行对照;利用HDACs抑制剂TSA或SB抑制上皮细胞HDACs活性,然后利用Poly(I∶C)刺激鼻黏膜上皮细胞,实验分六组:TSA单独刺激组;SB单独刺激组;Poly(I∶C)单独刺激组;TSA+Poly(I∶C)联合刺激组;SB+Poly(I∶C)联合刺激组;上皮细胞单独培养组.刺激24h后收集细胞上清、提取细胞总RNA和细胞总蛋白,利用ELISA检测HDACs抑制剂对不同组鼻黏膜上皮细胞表达IL-6和IL-8水平的影响;利用荧光定量PCR方法检测不同刺激因素对上皮细胞表达抗菌肽LL37的影响;通过western-blot方法分析抑制HDACs活性对LL37蛋白表达的影响。 结果:荧光定量PCR的结果显示TSA(200nM)和SB(4mM)能够诱导LL37基因的表达,并且这种促进作用是不依赖于Poly(I:C)的刺激;western-blot的结果显示TSA和SB可诱导NCI-H292细胞LL37蛋白表达增加,而对鼻黏膜上皮细胞LL37蛋白的表达无明显影响;ELISA检测显示TSA或SB作用于上皮细胞后能够显著抑制Poly(I:C)诱导的鼻黏膜上皮细胞IL-6和IL-8的表达。 结论:HDACs抑制剂SB和TSA能够直接诱导呼吸道上皮细胞LL37基因的表达,同时可诱导LL37蛋白在下呼吸道黏膜上皮细胞的表达;SB和TSA能够抑制鼻黏膜上皮细胞表达IL-6和IL-8。
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