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为开发适用于猪的能够稳定携带外源基因的口服活疫苗载体,本研究在减毒猪霍乱沙门菌△cyaC78-1基础上,利用自杀性质粒介导的等位交换技术,构建△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统,并进一步研究其生物学特性.PCR及测序结果表明△cya△asdC78-1构建成功.其生物学特性检测结果表明△cya△asdC78-1的血清型与△cyaC78-1和疫苗株C500相同,并能够稳定遗传缺失后的asd基因;其生长速度与△cyaC78-1基本相同,且均明显慢于疫苗株C500;其生化特性结果也与△cyaC78-1完全相同.小鼠攻毒试验表明△cya△asdC78-1电转了携带asd基因的互补质粒pYA3493后,其毒力较△crp△asdC78-1 (pYA3493)降低了1.14倍,较△asdC500 (pYA3493)降低了5.1倍.以上结果表明,减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1同样可以作为口服活疫苗载体用于高效表达外源基因,本研究为开发以C78-1为基础的口服多价疫苗载体奠定了基础.