减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统的构建及其生物学特性研究

来源 :中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第十一次全国学术研讨会暨第五届会员代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nizhongyu
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  为开发适用于猪的能够稳定携带外源基因的口服活疫苗载体,本研究在减毒猪霍乱沙门菌△cyaC78-1基础上,利用自杀性质粒介导的等位交换技术,构建△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统,并进一步研究其生物学特性.PCR及测序结果表明△cya△asdC78-1构建成功.其生物学特性检测结果表明△cya△asdC78-1的血清型与△cyaC78-1和疫苗株C500相同,并能够稳定遗传缺失后的asd基因;其生长速度与△cyaC78-1基本相同,且均明显慢于疫苗株C500;其生化特性结果也与△cyaC78-1完全相同.小鼠攻毒试验表明△cya△asdC78-1电转了携带asd基因的互补质粒pYA3493后,其毒力较△crp△asdC78-1 (pYA3493)降低了1.14倍,较△asdC500 (pYA3493)降低了5.1倍.以上结果表明,减毒猪霍乱沙门菌△cya△asdC78-1同样可以作为口服活疫苗载体用于高效表达外源基因,本研究为开发以C78-1为基础的口服多价疫苗载体奠定了基础.
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