【摘 要】
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目的：血清蛋白在特殊生理或病理状态下往往经过剪切、翻译后修饰加工为成熟蛋白发挥生物学功能,但目前的质谱鉴定只能粗略鉴定蛋白,并不能确定蛋白的亚型及剪切片段。使用succinimidyloxycarbonylmethyltris(2,4,6-trimethoxyphenyl) phosphonium bromide(TMPP-Ac-OSu)专一地对蛋白质N端进行化学标记,结合质谱分析,在给出蛋白鉴定
【机 构】
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南方医科大学口腔医学院 兰州大学口腔医学院
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目的：血清蛋白在特殊生理或病理状态下往往经过剪切、翻译后修饰加工为成熟蛋白发挥生物学功能,但目前的质谱鉴定只能粗略鉴定蛋白,并不能确定蛋白的亚型及剪切片段。使用succinimidyloxycarbonylmethyltris(2,4,6-trimethoxyphenyl) phosphonium bromide(TMPP-Ac-OSu)专一地对蛋白质N端进行化学标记,结合质谱分析,在给出蛋白鉴定结果的同时,也确定了蛋白质N端,达到精确鉴定蛋白的目的。方法：以C57BL/6J系孕鼠血清为例,首先利用糖苷酶酶切血清中大分子蛋白的糖链,以便于在双向电泳中分离到目标蛋白,双向电泳分离蛋白,在胶内酶解之前,使用TMPP-Ac-OSu试剂处理样品,经过简单的洗脱步骤,高效地标记蛋白N端,通过LTQ-orbitrap液质联用仪鉴定蛋白。结果：通过常规质谱鉴定的Haptoglobin、pregnancy zone protein蛋白,用我们的方法进一步精确为haptoglobin β-subunit、pregnancy zone protein 35 kDa亚型,并发现了四种蛋白为其理论序列的剪切片段：其中三种是剪切掉信号肽的成熟蛋白,另外一种蛋白complement component 3发现了新的剪切形式。结论：通过在质谱过程中添加几步操作,在质谱鉴定的同时确定蛋白的亚型,有助于确定蛋白亚型及寻找新的剪切形式。
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研究目的：肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多效生长因子,在牙胚发育过程中起着重要的作用,本实验对其在牙乳头细胞(human dental papilla cells, hDPCs)迁移中的作用及机制进行了初步研究.材料和方法：以体外培养的hDPCs为实验对象,phalloidin染色观察HGF对hDPCs骨架的影响,Vinculin免疫荧光观察HGF
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目的：本研究探讨Th17和Tregs平衡失调与大鼠根尖周炎的炎症反应及牙槽骨 破坏的关系。方法：选取5周龄雄性Wistar大鼠(n=20),实验组用球钻将下颌第1磨牙开髓,根管锉清理牙髓,髓腔暴露于口腔中,14d、28d后断颈处死。以未开髓的上颌第1磨牙作为对照组。取上下颌骨,采用Micro-CT观察根尖病损的形成情况；部分标本固定,脱钙,冰冻切片,组织学方法观察根尖病损的特点,采用抗CD68、l
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