【摘 要】
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[目的]已报道PmrA/PmrB二元调控系统在革兰氏阴性菌对多粘菌素B耐药过程中起重要作用,基于此认识,本试验拟探讨PmrA/PmrB二元调控系统介导大肠杆菌对多粘菌素E耐药的可能
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,南京210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
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[目的]已报道PmrA/PmrB二元调控系统在革兰氏阴性菌对多粘菌素B耐药过程中起重要作用,基于此认识,本试验拟探讨PmrA/PmrB二元调控系统介导大肠杆菌对多粘菌素E耐药的可能性,从而更好地理解细菌耐药性的发生机制和传播规律.[方法]首先对临床分离的52株禽致病性大肠杆菌对多黏菌素E的敏感性进行检测,然后采用step-wise方法对多黏菌素敏感菌株进行耐药性诱导,通过PCR扩增PmrA/PmrB后采用Mega软件进行突变位点分析,最后采用real time RT-PCR技术检测其mRNA表达水平的变化,拟阐明PmrA/PmrB二元调控系统对禽致病性大肠杆菌耐药性产生的贡献.[结果]MIC结果显示,52株大肠杆菌中,88.46％(44/52)对多粘菌素E敏感,中介及耐药菌株均为5.8％ (3/52).突变位点分析表明诱导成功的5株耐药菌(9R、36R、53R、91R,107R) pmrA未发生突变,而PmrB均有不同程度的突变.其中9R,36R和53R各在G56A (R19Q),T500C (L167P),T265A (Y89N)发生点突变,91R,107R在239位和478位各插入长为30 bp和128 bp的序列,除36R外,其余耐药菌株突变位点均未见报道.RT-PCR结果显示发生点突变的三株耐药菌PmrA/PmrB表达量均极显著(P＜0.01)或显著(P＜0.05)上升；发生插入突变的两株耐药菌PmrA/PmrB表达量虽有上升趋势,但变化不显著(P＞0.05).[结论]pmrA和pmrB在大肠杆菌对多粘菌素E的耐药中起重要作用,其中pmrB的点突变伴随pmrA/pmrB的高表达以及pmrB的插入突变是导致禽致病性大肠杆菌对多粘菌素E高度耐药的主要原因.
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