随着人们营养观念的改变，乳品中的高蛋白、低脂肪已经成为衡量乳品质的重要指标。乳蛋白是乳重要的营养组成成分，具有较高的营养价值。己有研究证明，只有深入了解反刍动物乳腺组织对氨基酸的吸收代谢模式和乳腺组织乳蛋白合成的可吸收氨基酸的比例才能提高乳腺乳蛋白的产量，改善乳品质。本试验旨在探究单一添加不同浓度的赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞的增殖,以及mTOR信号通路介导的酪蛋白合成相关基因的影响.在试验期,细胞处理时用厄尔平衡溶液(EBSS)代替正常培养基,在此基础上依次添加不同浓度的赖氨酸,采用MTT法检测培养12h和24h的细胞增殖和利用qRT-PCR技术检测4个编码酪蛋白基因和8个mTOR信号通路中与乳蛋白合成翻译相关的基因的相对表达量.结果表明:添加赖氨酸12 h,浓度范围为0.5～24 mmol/L时,原代奶牛乳腺上皮细胞增殖数量增加(P=0.05);添加赖氨酸24h,浓度范围为0.5～8mmol/L时,细胞增殖数量增加(P＜0.01).当赖氨酸的添加浓度在0.5～8mmol/L时CSN1S1,CSN1S2,CSN2,CSN3基因表达均显著上调(P＜0.01).当赖氨酸添加0.5～16mmol/L时mTORC1复合物1中的mTOR和Gβl(P＜0.05)基因表达显著上调,而raptor基因表达在赖氨酸添加量为0.5～2mmol/L时显著上调(P＜0.05).在酪氨酸添加的不同浓度范围内,信号通路下游因子S6K1、4EBP1和eEF2基因表达均显著上调(P＜0.05);rps6基因表达上调,eIF4E基因表达下调,但差异均不显著.以上结果表明,补充赖氨酸能显著促进乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成,这一过程与mTOR信号通路介导蛋白质合成相关.