依博素生物合成基因ste15的克隆表达及酶学性质研究

来源 :2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周 | 被引量 : 0次 | 上传用户:libra_15
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目的:测定依博素生物合成基因ste15的酶学性质。 方法:将ste15基因克隆至质粒 pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,用连续偶联分光光度法对纯化的Ste15蛋白进行酶活性测定。 结果:SDS-PAGE结果显示在大约50kD处出现了一条新的蛋白条带,与推测值相符。Ste15蛋白在E.coli中以可溶和包涵体两种形式表达,二者各占50%,取可溶形式的蛋白用镍亲和柱层析纯化,得到单一条带蛋白。Ste15蛋白只催化UDP-葡萄糖转移到糖基接受体上,生成UDP,偶联NADH的氧化反应,而对其他几种活化糖基供体没有催化活性。 结论:Stel5蛋白是葡萄糖糖基转移酶,负责依博素生物合成中将核苷酸葡萄糖到多糖重复单元增长链的转移。
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