【摘 要】
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目的：Gsk-3β(Glycogen synthase kinase-3β)/β-catenin信号通路在腭发育过程中发挥着重要的调控作用.LiCl (lithium chloride)能够抑制Gsk-3β的表达从而激活Wnt/β-ca
【机 构】
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武汉大学口腔医学院口腔生物医学工程教育部重点实验室
【出 处】
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2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛
论文部分内容阅读
目的：Gsk-3β(Glycogen synthase kinase-3β)/β-catenin信号通路在腭发育过程中发挥着重要的调控作用.LiCl (lithium chloride)能够抑制Gsk-3β的表达从而激活Wnt/β-catenin信号通路,其对骨形成也具有调控作用.本实验主要探讨LiCl对体外培养腭板的融合及成骨分化的影响.方法：选取CD1孕鼠胚胎第13天(E13)腭板进行体外培养,将其分成LiCl干预组(10mM)和对照组(PBS),72小时后收集组织.将组织常规固定包埋后切片,分别进行HE染色和免疫组化,观察腭板融合情况及组织中成骨标志物(碱性磷酸酶、骨钙素)表达的变化,用Ki-67免疫组化和TUNEL染色等方法检测腭板中细胞增殖和凋亡情况.提取组织RNA后用定量PCR检测成骨标志物(碱性磷酸酶、骨钙素、Runx2)及Gsk-3β在mRNA水平表达的变化,提取组织蛋白后用Western blotting分析Gsk-3β及β-catenin在蛋白水平表达的变化.结果：将1OmM LiCl作用于体外培养的腭板72小时后,腭中线上皮缝没有完全消失,腭板不能正常融合；成骨标志物在mRNA和蛋白水平的表达均较正常组明显降低(P＜0.05)；腭板类骨质区域Ki67阳性细胞数目显著性增加(P＜0.05),而两组在间充质区域Ki67阳性细胞数目并没有显著性差异；腭中线上皮缝处凋亡细胞明显减少(P＜0.01)；Gsk-3β在mRNA和蛋白水平的表达均下降(P＜0.05)；而β-catenin蛋白表达反而增加(P＜0.01).结论：LiCl通过抑制GSK3β的表达来激活β-catenin信号通路,从而抑制腭板融合及成骨分化.这也表明激活经典的Wnt信号通路可能导致腭板不能正常融合.
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