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目的:白介素-17A(IL-17A)在牙周炎牙槽骨改建过程中扮演重要角色,前期实验发现磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路参与骨改建过程。本研究旨在探索IL-17A对前成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、钙化功能的影响及其依赖AKT2的初步机制研究。方法:前期实验中采用基因干扰技术成功将MC3T3-E1细胞AKT2基因沉默,并与正常的MC3T3-E1细胞分别于有或无IL-17A的培养基中培养。通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。在增加诱导培养条件后,western-blot检测PI3K及p-PI3K,real-time PCR检测细胞成骨相关基因的表达,包括Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)及IL-17A受体(IL-17RA)。同时,采用碱性磷酸酶活性测定法、茜素红染色法检测分化与钙化功能。结果:在IL-17A作用于AKT2基因沉默及正常的MC3T3-E1细胞后,显示p-PI3K表达上调,IL-17A受体表达增加(P<0.05)。MTT表明AKT2基因沉默后MC3T3-E1细胞增殖减慢(P<0.05),而IL-17A的作用并无明显影响。细胞周期结果表明AKT2基因沉默后较正常组细胞处于G0/G1期比例上调(P<0.05),但S期与G2/M期细胞比例下降(P<0.05),而IL-17A作用后未发现明显改变。且在诱导条件下正常MC3T3-E1细胞与AKT2基因沉默细胞中Runx2、ALP及OCN基因表达均上升,碱性磷酸酶性,钙化结节染色增加均明显(P<0.05),IL-17A作用后,发现AKT2基因沉默细胞组第7日Runx2 m RNA表达,ALP m RNA表达;第14日OCN m RNA表达.ALP浓度百分比,茜素红-S染色的积分光密度值(IOD)/105均较正常组明显升高(P<0.05):可知IL-17A对正常MC3T3-E1细胞的上述促进作用较AKT2基因沉默细胞更加明显。结论:AKT2与前成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及钙化相关;IL-17A依赖AKT2对MC3T3-E1细胞分化、钙化活动起促进作用。