【摘 要】
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用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29 (a)上,得到pET29a-PPV重组载体,然后将该载体转化大肠杆菌BL21 (DE3),经过IPTG诱导PPV
【机 构】
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中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心,中山528403
【出 处】
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中国植物病理学会2014年学术年会
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用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体pET29 (a)上,得到pET29a-PPV重组载体,然后将该载体转化大肠杆菌BL21 (DE3),经过IPTG诱导PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达.回收表达蛋白后免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价分别为4×103.然后采用该抗血清制备出专门检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条,测试结果表明,该试纸条不仅特异性强、稳定性好,灵敏度也高,可以检测到1 μg/mL粗提病毒和稀释100倍的病汁液,操作简便,10min之内即可出检测结果,特别适宜口岸检疫和田间快速诊断.
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