论文部分内容阅读
目的:研究银杏叶提取物对LPS诱导下人牙周膜成纤维细胞EDNRA、MMP-1基因表达的影响,探讨银杏叶提取物防治牙周炎的可能机制。方法:采用"改良酶消化联合组织块法"原代培养hPDLCs,常规SABC免疫组化法鉴定细胞来源。取3-5代对数期细胞给予10、100、200μg/ml LPS作用24、48、72h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞毒性实验。取3-5代对数期细胞给予不同浓度(0.002mg/ml、0.004mg/ml、0.006mg/ml、0.008mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.06mg/ml、0.08mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml)GBE作用24、48h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞毒性实验并计算IC50。最终选择刺激浓度60μg/ml GBE作用48h,1μg/ml LPS作用6h,qRT-PCR检测EDNRA、MMP-1 mRNA表达的变化。结果:10、100、200μg/ml LPS作用24、48、72h均能促进hPDLCs增殖,与对照组相比,10、100μg/ml LPS作用24h及100μg/ml LPS作用48h差异有统计学意义(P<0.05)。GBE作用hPDLCs 24h的IC50值为0.42-1.45mg/ml,48h的IC50值为0.28-0.82mg/ml。与对照组相比,1μg/ml LPS下调hPDLCs中EDNRA mRNA的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。与LPS组相比,60μg/ml GBE上调hPDLCs中EDNRA mRNA的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,1μg/ml LPS上调hPDLCs中MMP-1 mRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。与LPS组相比,60μg/ml GBE下调hPDLCs中MMP-1 mRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:银杏叶提取物能够上调hPDLCs中EDNRA,下调hPDLCs中MMP-1的表达。银杏叶提取物可能通过上调EDNRA抑制牙周组织分解。