[目的]TatD脱氧核糖核苷酸酶（TatD-like DNase）广泛存在于多种生物体内,已有研究表明它与病原微生物逃避宿主免疫密切相关。化脓隐秘杆菌是引起奶牛乳房炎及子宫内膜炎的重要致病菌之一,本研究旨在初步探讨化脓隐秘杆菌TatD-like DNase的功能,将为进一步研究化脓隐秘杆菌的免疫逃逸机制奠定基础。[方法]采用常规方法构建化脓隐秘杆菌tatD960基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达,获得可溶性蛋白,采用Ni-NTA方法纯化重组蛋白;采用酚氯仿抽提方法制备小鼠肝脏组织DNA;将Mg²⁺、Cu²⁺、Zn²⁺、Ni²⁺、Ca²⁺等五种金属离子分别作用于重组蛋白TatD960,使用荧光染料Picogreen检测TatD960对鼠源DNA的影响。[结果]结果表明,化脓隐秘杆菌TatD960可降解DNA,其合适的反应温度为35-41℃,Mg²⁺、Ni²⁺和Ca²⁺能够促进其对DNA的降解作用。[结论]化脓隐秘杆菌TatD960在体外可降解鼠源DNA,且是一种Mg²⁺依赖的脱氧核糖核苷酸酶;化脓隐秘杆菌TatD-like DNase对其自身毒力及致病性的影响有待进一步研究。