通过杂交瘤细胞技术制备了6株抗禽HEVORF2蛋白的单克隆抗体，然后western blot和间接ELISA检测发现，两株单抗3E8和1B5可以与人、猪HEV的ORF2蛋白发生交叉反应，提示两株单抗识别的抗原表位可能是禽、人和猪HEV共有的抗原表位。随后本研究通过噬菌体展示技术对两株单抗识别的抗原表位进行了鉴定，经三轮生物淘选及对淘选产物测序，获得了两株单抗3E8和1B5识别的两个线性多肚的氨基酸序列为IPHD和VKLYMS。通过序列比对分析，发现单抗3E8筛淘的序列IPHD与人、猪HEV ORF2蛋白442IPHD445完全一致，同时与禽HEV ORF2蛋白372VPHD375高度同源;而单抗1B5筛淘序列VKLYMS与禽HEV ORF2蛋白354~360氨基酸区域和人、猪HEV ORF2蛋白424~430氨基酸区域完全一致，因此IPHD和VKLYMS是禽、人和猪HEV两个共有的抗原表位。为进一步鉴定具体氨基酸对抗原表位的影响，通过合成不同的多肽以及原核表达截短和突变的重组蛋白为抗原，同样通过间接ELISA和westernblot方法分析替换或缺失氨基酸对抗原表位特异性的影响。结果发现单抗3E8识别的抗原表位中P,H为决定性氨基酸，I,D为辅助性氨基酸，而单抗1B5识别的抗原表位中每个氨基酸均起关键性作用，突变任何一个氨基酸，该多肽均不与单抗发生反应。最后利用两个共有抗原表位的模拟肽为包被抗原，间接ELISA检测禽、人和猪HEV阳性血清，结果发现均发生有效的阳性反应。