【摘 要】
：
对单股正链RNA病毒的研究发现：基因组5’非翻译区(5’UTR)在病毒的复制，转录，翻译过程中发挥了至关重要的作用。对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)5UTR的研究意义重大。因此本研究在PRRSV感染性克隆pCBC2的基础上，通过突变PCR获得了病毒基因组5’UTR系列缺失的全长突变体克隆：pCBCM1，pCBCM3，pCBCM5，7，9，45，69，100，随后将上述突变体体外转录成RN
【机 构】
：
中国农业科学院上海兽医研究所 中国动物卫生与流行病学中心上海分中心 动物传染病研究室农业部动物寄生虫病重点实验室上海 200232
【出 处】
：
2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
论文部分内容阅读
对单股正链RNA病毒的研究发现：基因组5’非翻译区(5’UTR)在病毒的复制，转录，翻译过程中发挥了至关重要的作用。对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)5UTR的研究意义重大。因此本研究在PRRSV感染性克隆pCBC2的基础上，通过突变PCR获得了病毒基因组5’UTR系列缺失的全长突变体克隆：pCBCM1，pCBCM3，pCBCM5，7，9，45，69，100，随后将上述突变体体外转录成RNA之后转染MARC-145细胞，进行病毒感染性、复制和转录分析，以鉴定特定的缺失区的调控功能。结果显示：病毒5’UTR起始的第1个碱基是保持病毒感染性非必需的核苷酸；前45个碱基对病毒基因组的复制是非必需的。Northern Blot结果显示pCBCM1亚基因组mRNA可以进行高效率的转录，而其余突变体的亚基因组转录受到严重抑制。由此证明，PRRSV 5’UTR的完整性对病毒意义重大，碱基的少量以及大部分缺失会对病毒产生极大的影响。
其他文献
为了科学评价煤矿废弃地的适宜性,本文通过与专家座谈以及实地调研等方法,选取适当的评价指标,并综合三标度打分法和层次分析法确定各指标的权重,采用灰色关联分析,建立了煤矿废弃地适宜性评价模型,并结合其它用地的评价方法和评价体系,对煤矿废弃地进行了适宜性评价.最后运用该模型对辽宁阜新市矿区煤矿废弃地进行了适宜性评价,结果表明该模型能够为确定矿区废弃土地的适宜性提供决策支持。
本文介绍了复杂场景模型的建立方法和模拟驾驶控制方法,重点在于多维数模型的定位与相对的车辆运动方式控制.在模型的建立与控制过程中,开创性的避开了复杂的构造贝塞尔(Bezier)曲面的建模方法,利用分块建模和分块控制来完成复杂场景的模拟,同时运用面向对象的设计方法,使得编码更简单,模拟更真实。
为研究狂犬病毒形态和形态发生情况，以口服弱毒疫苗株SRV9毒株为原始材料，经鼠脑复壮后接种BHK-21细胞，分别观察感染后不同时间病毒在BHK-21细胞上的形态发生情况、纯化后病毒粒子的形态和鼠脑复壮前后病毒粒子形态的差异。结果显示：病毒感染细胞24h后可以在细胞浆内观察到典型病毒粒子，其数量随着培养时间的延长而增加；感染后96h内病毒从细胞膜表面以出芽方式释放；感染细胞经常规带毒传代后病毒从细胞
目的：制备抗狂犬病病毒重组免疫毒素RVScFv-PE40并研究其靶向细胞毒作用。方法:将抗狂犬病病毒糖蛋白ScFv基因克隆人表达载体PET-PE40，转化Ecoli.DH5α，经酶切及DNA序列测定鉴定重组质粒，转化表达宿主菌Ecoli.BL-21，IPTG诱导表达目的蛋白，SDS-PAGE、Western-blotting检测蛋白表达水平及特性，体外复性并经离子交换色谱柱、疏水作用色谱柱及Sph
2007年4月北京某猪场发生一起主要以保育猪为主要发病对象的传染病，主要为高热，皮肤出血，母猪流产为主要临床症状，解剖症状以间质性肺炎为主要特征，经过病原分离，得到一株引起Marc-145细胞病变的病毒，通过血清中和试验、RT-PCR、序列测定，确定分离物中为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株，结合该病的流行特征、临床变化、解剖症状和实验室检验，确诊该传染病为猪繁殖与呼吸综合征变异株
目前，高致病性变异株引起的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)在我国25个省市暴发并流行，造成较大的经济损失，严重地影响了我国养猪业的发展。为此，我厂采用中国动物疾病预防控制中心提供的高致病性变异株(NVDC-JXA1株)通过人工感染的方式进行动物试验，试验动物为25日龄仔猪、50-60日龄保育猪、育肥猪以及怀孕80天以上的母猪。通过该试验，既可以了解该毒株引起猪的发病率、同居感染率以及病死率的高低，同
将江西流产胎儿的病变组织悬液，接种细胞，TCID50的测定、特异性检验和RT-PCR扩增，鉴定为猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株。将该毒株人工攻击不同日龄的PRRS阴性猪，观察临床变化，剖解取病变组织，进行细菌学及病毒的检测。
从2006年猪高热病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合症病毒(HuN株)，经过RT-PCR、序列测定，获得该病毒的基因全长，全长为15，328nt，GENBANK登录号为EF517962；经过与标准毒株VR-2332的比较发现在非结构蛋白中，最保守的区域为NSP9，变异最大区域是NSP2；在结构蛋白中最保守的区域为ORF6，变异最大的为ORF5。同时对同时期分离自高热病的其它毒株5’UTR比较发现，该
近年来在全国范围广泛流行的“猪无名高热”的主要病原之一为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。本研究根据PRRSV基因组序列设计特异性引物，分五段扩增了高致病性猪蓝耳病病毒JX0612株的全长cDNA，将各cDNA片段克隆到pBlueScript Ⅱ SK(+)载体中，并且利用重叠区单酶切位点将其连接成JX0612株的全长cDNA克隆。运用5’RACE扩增到基因组5’最末端序列，亚克隆到pBlue
利用RT-PCR技术确定了PRRSV北美株各TRS-B位置及各sgmRNA Leader-Body junction序列。继而以PRRSV北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作，以点突变PCR对所确定的形成sgmRNA7的TRS-B进行突变，构建一系列全长突变体，解析TRS-B突变对病毒感染性及亚基因组转录的影响。结果发现：TRS-B 3’碱基的突变使sgmRNA7转录减弱，且一起突变R