论文部分内容阅读
断奶常诱发仔猪采食量降低、生长性能下降以及腹泻率上升等应激综合症。小肠作为机体对营养物质消化、吸收和代谢最主要的器官,以及抵御病原体和致癌物等有害物质的屏障,其发育受阻被认为是导致断奶应激综合症最主要的原因之一.药理剂量氧化锌可以明显抑制小肠发育受阻进而改善断奶应激。本研究旨在探讨日粮添加药理剂量氧化锌对断奶仔猪肠道蛋白质表达、氧化状态以及肠细胞增殖和凋亡的影响,进一步揭示氧化锌作为一种无抗饲料添加剂减缓仔猪断奶综合症的机理。试验选用28 d断奶仔猪(大×长×皮)32头,随机分为2组,每组16头,分别饲喂正常剂量氧化锌日粮(100mg/kg氧化锌,对照)和药理剂量氧化锌日粮(3000 mg/kg氧化锌,处理),试验采用玉米一豆粕型基础日粮,饲喂期15 d。试验结束后,根据仔猪断奶综合症(腹泻率)的改善情况,从对照和处理组中各选4头仔猪,取其空肠作为材料,进行蛋白质组学、氧化还原指标以及蛋白免疫印迹分析。蛋白质组学分析结果表明:与对照组相比,高锌组中有22个蛋白质点表达量上调,其中11个蛋白质点为高锌组特异性表达;同时有22个蛋白点表达量下调,其中16个蛋白点在高锌组特异性消失。主要差异表达蛋白涉及到:①
能量代谢相关通路:琥珀酰辅酶A转移酶(Succinyl-CoA transferase)上调,肌酸激酶(creatinekinase M—type)下调;②氧化应激相关通路:葡萄糖调节蛋白78(78 kDa gltlcoge—regulated protein)和谷胱甘肽硫转酶(glutathione—S—transferaseω)下调;③增殖凋亡相关通路:A—Raf原癌基因丝/苏氨酸蛋白激酶(A—Raf-1)和钙网蛋白(calregulin)上调。上述结果预示着:氧化锌可以在一定程度上减缓断奶所引起的肠道上皮细胞氧化状况恶化,为肠道细胞增殖创造良好的环境。生化水平上肠细胞氧化还原状况分析表明,高锌日粮使断奶仔猪肠道细胞中还原型与氧化型谷胱甘肽比值(GSH/GSSG)提高80%,使与氧化应激密切相关的两个酶:谷胱甘肽硫转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)的活性分别降低47%和81%。
进一步的蛋白免疫印迹分析证实,高锌日粮可使肠细胞中与凋亡相关的活性caspase-3表达量降低61%。综合上述实验结果,我们认为:作为一种无抗饲料添加剂,药理学剂量的氧化锌日粮,可在一定程度上减缓断奶所引起的仔猪肠道细胞的氧化应激,改善断奶仔猪肠道细胞的氧化还原状态,抑制肠细胞凋亡而使肠细胞处于正常的增殖状态,避免仔猪断奶后的肠道功能紊乱,减少了腹泻等一系列仔猪断奶综合症的发生。