【摘 要】
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目的 胚胎干细胞移植对受损心脏心功能的改善已经得到广泛的认可,但胚胎干细胞移植后导致的畸胎瘤形成的问题严重阻碍了其临床应用.避免胚胎干细胞移植后畸胎瘤的发生已成为其从试验研究向临床应用过渡的关键,本研究探讨了心肌方向诱导分化和富集对胚胎干细胞在心肌缺血部位移植后的致肿瘤能力的影响.方法 应用抗坏血酸诱导小鼠D3谱系的胚胎干细胞向心肌细胞方向分化,应用Percoll密度梯度离心的方法对胚胎干细胞来源
【出 处】
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2013中国医师协会中西医结合医师大会
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目的 胚胎干细胞移植对受损心脏心功能的改善已经得到广泛的认可,但胚胎干细胞移植后导致的畸胎瘤形成的问题严重阻碍了其临床应用.避免胚胎干细胞移植后畸胎瘤的发生已成为其从试验研究向临床应用过渡的关键,本研究探讨了心肌方向诱导分化和富集对胚胎干细胞在心肌缺血部位移植后的致肿瘤能力的影响.方法 应用抗坏血酸诱导小鼠D3谱系的胚胎干细胞向心肌细胞方向分化,应用Percoll密度梯度离心的方法对胚胎干细胞来源的心肌细胞进行富集.通过RT-PCR检测胚胎干细胞、胚胎干细胞来源的心肌细胞以及富集后的胚胎干细胞来源的心肌细胞中胚胎干细胞特殊转录因子OCT-4的表达.按照胚胎干细胞的心肌方向诱导分化和富集与否分为三组,将胚胎干细胞、胚胎干细胞来源的心肌细胞以及Percoll富集后的胚胎干细胞来源的心肌细胞分别移植到免疫抑制的健康大鼠的心肌缺血部位,5×106细胞/只,每组10只大鼠.移植后的第八周,获取心脏,从心肌方向诱导分化和富集两个方面,根据种子细胞移植后肿瘤的发生率和体积两个角度进行统计学分析,比较畸胎瘤的发生情况.结果 胚胎干细胞来源的心肌细胞中后仍有多潜能的胚胎干细胞特殊转录因子OCT-4的表达,而在Percoll富集后的胚胎干细胞来源的心肌细胞中则未检测.胚胎干细胞和胚胎干细胞来源的心肌细胞移植组在心肌缺血部位移植后均有畸胎瘤的发生,发生率分别为80％(8+/2-)和30％(3+/7-),肿瘤体积的均数分别为81.49mm3和53.84 mm3,而percoll富集的胚胎干细胞来源的心肌细胞移植组则未检测到畸胎瘤的发生.统计学分析的结果表明胚胎干细胞来源的心肌细胞移植组的肿瘤发生率和体积均明显低于胚胎干细胞移植组.结论 Percoll密度梯度离心的方法可以进一步降低胚胎干细胞来源的心肌细胞中多潜能的胚胎干细胞的含量.心肌方向诱导分化可以明显降低胚胎干细胞在心肌缺血部位移植后的致肿瘤的能力,而要进一步降低畸胎瘤的发生率甚至避免畸胎瘤的发生,则需要对胚胎干细胞来源的心肌细胞进行富集.
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