目的:TvaX1多肽在免疫激活通路中发挥重要作用,是T细胞活化的关键酶。本文运用ELISA方法对TvaX1多肽进行线性研究,为TvaX1多肽的含量测定提供依据。方法:ELISA方法的原理是采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用酶标仪加以测定。ELISA具有敏感性高、特异性强等优点。本文采用酶联免疫吸附法(ELISA),使TvaX1多肽抗原与固定的抗体结合,再加入酶标记的抗体,通过酶标二抗与底物显色,根据颜色的深浅判断样品中TvaX1多肽的含量。结果:在0.195 ng/mL~12.5 ng/mL线性范围内,线性关系良好,标准曲线方程为y=15.1x-0.26,R~2=0.9968。考察了5条标线,各浓度的平均回收率分别为95.9%、96.7%、97.1%、104.3%、106.3%、107.1%和91.7%,均在80%~120%范围内。各浓度的变异系数CV分别为13.7%、8.3%、11.1%、8.2%、6.2%、9.0%和6.2%,均<15%,可见ELISA标线的重复性好,精密度和准确度符合验证要求。结论:本实验建立的ELISA方法在0.195 ng/mL~25 ng/mL线性范围内,线性关系良好,可用于TvaX1多肽含量的检测。