CD147在大鼠脑出血后脑损伤中的作用及安宫牛黄丸的影响

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目的;观察SD大鼠脑出血后血肿周围脑组织中CD147(又称基质金属蛋白酶诱导因子)的表达变化情况及安宫牛黄丸对CD147和MMP-9表达的影响,进一步探讨CD147在脑出血后炎症反应中的作用机制和安宫牛黄丸对脑出血后继发性脑损伤的保护作用方法:采用立体定向技术将Ⅶ胶原酶注入大鼠苍白球区制作脑出血模型;将130只雄性225-275gSD大鼠,将其随机分为四组:正常组(n=10),假手术组(生理盐水组)(n=40),脑出血模型组(n=40),安宫牛黄丸治疗组(n=40)。分别采取免疫组化及RT-qPCR的方法检测CD147在脑出血后血肿及其周围组织的表达,最后对试验数据进行统计学分析。结果:1.神经功能缺损评分:正常组和假手术组(生理盐水组)麻醉苏醒后无神经功能缺损症状;脑出血模型组麻醉苏醒后在相应时间点均有不同程度的神经功能缺损症状,24h达高峰,72h时症状较24h部分缓解,7d时神经功能缺损症状有明显恢复;安宫牛黄丸干预组神经功能缺损症状较模型组有不同程度缓解,恢复快,两组比较除6h时间点外余各时间点差异均有统计学意义,P<0.001。2.病理学形态观察正常组和假手术组相应区域细胞形态完整,结构清晰,排列整齐,细胞间连接紧密,无水肿及炎性细胞浸润。模型组:可见以穿刺点为中心的椭圆形或类圆形血肿,血肿周围脑组织水肿、液化坏死,细胞排列松散紊乱,细胞核固缩、深染,结构不清,部分血细胞溶解,含铁血黄素沉积,大量炎性细胞聚集,以单个核细胞为主,伴胶质细胞增生,新生血管形成。安宫牛黄丸干预组:血肿体积缩小,血肿周围脑组织水肿明显吸收,炎症细胞浸润明显减轻,胶质细胞增生减少,核固缩不明显,核仁较清晰,细胞排列较整齐、有序,细胞间隙缩小,结构较清晰。3.免疫组织化学结果:ICH模型组CD147、MMP9于6h开始表达,24h达峰值,72h开始逐渐下降,7d时表达明显降低。安宫牛黄丸干预组与模型组表达趋势相近,但各相应时间点表达水平有不同程度下降。统计分析显示,模型组各时间点CD147、MMP9表达变化与正常组和假手术组相比,差异有统计学意义,P<0.05。安宫牛黄丸干预组与模型组各时间点相比CD147、MMP9表达均有不同程度降低,差异有统计学意义,P<0.05。实验结果表明,ICH后血肿周围组织CD147、MMP9表达之间呈正相关关系。4.RT-qPCR检测结果:假手术组(生理盐水组)在6h、24h、72h、7d各时间点均有少量表达,组内各时间点表达差异无统计学意义,P>0.001。模型组CD147于ICH后6h表达上调,24h达峰值,72h较24h表达有下降,7d时表达量明显下降,组内各时间点比较差异有统计学意义,P<0.001。6h、24h、72h模型组、安宫牛黄丸干预组与正常组和假手术组比较CD147表达差异有统计学意义,P<0.001;7d时模型组CD147表达较假手术组差异有统计学意义,P<0.001;模型组与安宫牛黄丸干预组比较差异有统计学意义,P<0.001;安宫牛黄丸干预组与假手术组比较,差异无统计学意义,P>0.001。结论:1、ICH后CD147在血肿周围组织中表达上调,且可能参与调节MMP9的表达;2、安宫牛黄丸的神经保护作用机制之一可能是通过抑制CD147和MMP9的表达来实现。
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