莱克多巴胺核酸适配体电化学生物传感器的研制

来源 :2013年霉菌毒素与饲料安全饲料毒理学术报告会暨饲料毒理学专业委员会第五届全国代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:teiku
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  莱克多巴胺( RAC) 是苯乙醇胺类 β2-肾上腺素兴奋剂,能够显著提高动物胴体的瘦肉率和降低体内脂肪的沉积率,因而被大量非法用于畜牧生产.食用残留有RAC的动物内脏,常造成人急性或慢性食物中毒.此外,RAC还是一种食源性兴奋剂,是大型运动赛事动物源性食品安全监控的重要项目.世界卫生组织食品添加剂专家联席委员会(JECFA)规定RAC在肝脏、肾脏、肌肉中最大残留限量(maximal residue limits,MRLs)分别为 40.0、90.0、10.0ng/mL.因此,研发高效检测RAC的新方法是控制RAC滥用的关键环节之一.本研究利用等温滴定量热法筛选到的莱克多巴胺核酸适配体做识别分子制作生物传感器,将适配体与RAC的结合作用转变为可检测的电信号,用差分脉冲伏安法对RAC进行定量检测.结果:利用等温滴定量热法从13bp长度的单链DNA随机序列库中筛选到一条对RAC有高亲和力的适配体(Kd=1.66×10-6 M),以此适配体作为识别元件成功的构建了莱克多巴胺适配体电化学生物传感器.差分脉冲伏安法分析,在5.0×10-2ng/mL-1.0×102ng/mL 浓度范围内,峰电流值的差值△Ip与莱克多巴胺浓度的对数呈现良好的线性关系,相关系数R2 = 0.9749,检测限为0.1 ng/mL,反应时间为15min.循环伏安法分析,在6.0×10-2V/s-2.2×102V/s扫速范围内,还原峰电流值(Ipc)与扫速(ν)呈现良好的线性关系,相关系数R2 = 0.9951,说明电子传递受表面控制;还原峰电压值(Epc)与扫速的对数(ln ν)呈现良好的线性关系,相关系数R2 = 0.9995.峰电流值与反应时间呈现良好的线性关系,相关系数R2=0.9916.
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