游离DNA定量检测在早期鉴别胶质瘤复发与放射性脑坏死中的价值

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目的放射治疗在原发性脑胶质瘤治疗中起着重要作用,放射治疗后的局部复发及放射性坏死仍然十分常见。为实现对脑胶质瘤复发与放射性坏死的早期无创鉴别诊断,本研究分析了两种大鼠模型血液和尿液游离DNA中B1重复序列及线粒体DNA(mt-DNA)的变化,探讨其临床应用价值。方法利用直线粒子加速器及脑立体定位仪分别建立放射性坏死大鼠模型、胶质瘤复发大鼠模型及健康对照大鼠(每组5只),对大鼠进行MRI扫描/活体荧光拍摄验证模型建立。分别在不同时间点收集大鼠血液、尿液标本(1W、2W、4W、8W、12W),采用血浆及尿液专用试剂盒对血浆、尿液样本进行游离DNA分离提取,利用荧光定量PCR方法分别检测血浆中B1重复序列及尿液中mt-DNA的水平,并对检测结果进行统计分析。同时在各时间点对大鼠脑组织做HE染色观察病理变化,评价该检查方法的应用价值。结果在放射性坏死模型大鼠中,接受60Gy单次照射24h后,尿液游离mt-DNA水平显著上升,达正常水平的2.29倍(p<0.001),随后mt-DNA水平逐渐恢复正常;第6W后,尿液游离mt-DNA再次显著升高,达正常水平的1.50倍(p<0.01),并于第8W达到峰值(为正常水平的10.92倍,p<0.001);血浆游离B1重复序列与尿液游离mt-DNA变化趋势大致相同,于照射4W后显著上升(为正常水平的2.15倍),至10W时到达峰值(为正常水平的6.56倍);在胶质瘤复发模型中,尿液游离mt-DNA及血浆游离B1重复序列水平均未见明显变化。结论:检测血浆游离B1重复序列及尿液游离mt-DNA水平,对放射性坏死的早期诊断具有一定的参考价值;胶质瘤复发模型中游离DNA无显著变化,故可以此作为标志物对放射性坏死与胶质瘤复发进行早期鉴别诊断。
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