新城疫国内标准强毒株F48E9株全长基因组克隆与分析

来源 :中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guobaoling1
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参考国外已发表的NDV La Sota基因组的核苷酸序列及F48E9株基因片段序列分别设计了8对引物(F1、F2、F3、F4、F5、F6、3、5)和两条反转录引物(3RT、5RT),用于扩增NDV F48E9株NP、P、M、F+HN、L基因(含非编码区)及3、5端cDNA,并将其克隆到pMD18-T载体上,经过限制性内切酶分析、质粒PCR和序列测定与比较证明我们获得了含有新城疫病毒F48E9株全长基因组分段克隆的阳性重组p3、pM1、pM2、pM3、pM4、pLA、pLB和p5.应用DNASIS分析软件将所获得分段克隆的序列进行连接,获得F48E9全基因组核苷酸序列,发现其全基因组长为15192碱基,并且在La Sota、B、Clone30、V4和ZJ1相应片段的核苷酸与氨基酸序列进行了同源性比较.
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