60Co射线照射后人正常肝细胞子代基因谱的改变

来源 :第七届中国核学会“三核”论坛暨中国毒理学会放射毒理委员会第八次全国会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sccd920141
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  目的:利用基因芯片技术研究60Co射线照射后肝细胞子代基因谱的改变,为进一步研究辐射诱发基因组不稳定性的分子机制提供依据.方法:取对数生长期的肝细胞,在冰浴下用60Co辐照装置照射(剂量为2、4和6Gy).将照射后的克隆存活细胞培养至15代,利用含有48000条人基因的Illumina光纤微珠基因芯片对受照肝细胞子代差异表达基因进行分析,同时利用实时荧光定量PCR技术对差异表达基因HAVCR2、RAN进行验证,最后对部分差异表达基因进行生物信息学分析并构建基因相互作用网络图.结果:在所分析的48000个基因中,2Gy照射组中共有262个差异表达基因,其中上调基因有130个,下调基因有132个;4Gy照射组中共有2746个差异表达基因,其中上调基因有1282个,下调基因有1463个;6Gy照射组中共有3406个差异表达基因,其中上调基因有1687个,下调基因有1719个.上述三个剂量组与对照组相比,共同差异表达基因有71个,其中上调基因有35个,下调基因有36个.实时荧光定量PCR结果显示,HAVCR2基因表达上调,其在2Gy、4Gy、6Gy组中的相对表达量分别为8.024、8.318、8.513;RAN基因表达下调,其在2Gy、4Gy和6Gy组中的相对表达量分别为0.867、0.866、0.853;检测结果与芯片检测结果的趋势相一致.利用BioCata公共信号通路资源数据库对三个剂量组共同差异表达的71个基因进行生物信息学分析,结果显示,其中13个基因有通路数据.这些通路涉及Adhesion、Apoptosis、Cell Activation、Cell CycleRegulation、Cell Signaling、 Cytokines/Chemokines、Developmental Biology、Expression、Hematopoiesis、Immunology、Metabolism等12个方面.利用GeneSpring软件构建了部分通路中差异表达基因的相互作用网络图.结论:基因芯片技术在基因组水平上证实了辐射可诱发人肝细胞基因组不稳定性,同时筛选出一批相关的差异表达基因,这些基因主要与细胞周期、细胞骨架和运动、细胞凋亡、细胞信号转导、DNA复制和修复等生物功能相关.构建了差异表达基因相互作用的网络图,初步揭示了RAN、CDT1、IER3、V-FOS等基因在辐射诱发基因组不稳定性进程中可能的生物学功能.
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