【摘 要】
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[目的]本文分离培养成年鸡原代肝细胞,建立恩诺沙星、内毒素联合致鸡原代肝细胞损伤的模型.[方法]离体两步胶原酶灌注法,分离鸡原代肝细胞,培养48h后进行以下试验：(1)单独
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会
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[目的]本文分离培养成年鸡原代肝细胞,建立恩诺沙星、内毒素联合致鸡原代肝细胞损伤的模型.[方法]离体两步胶原酶灌注法,分离鸡原代肝细胞,培养48h后进行以下试验：(1)单独致肝细胞损伤剂量确定,设置：空白组；恩诺沙星组(E1～8,终浓度：10、20、30、40、50、60、80、100 μg·m1-1)；脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组(L1 ～8,终浓度：10、20、30、40、50、60、80、100 μg·m1-1),继续培养24 h检测细胞活率、ALT、AST活性,筛选单独致损较佳剂量.(2)联合致肝细胞损伤剂量确定,设置：空白组,恩诺沙星联合LPS组(EL1 ～5,终浓度：20+ 10、20+ 20、20+ 30、20+ 40、20+ 50 μg·ml-1),相同指标筛选联合致损最佳剂量.[结果]E7～8、L5 ～8组活细胞数减少、ALT、AST活性上升显著(P＜0.01)；E4～6、L3～4组有同样变化,但不显著(P ＞0.05)；E1～3、L1 ～2组无变化.EL3 ～5组各指标变化显著(P ＜0.01)；EL1 ～2不显著(P＞0.05).[结论]单用恩诺沙星(80 μg· ml-1)、单用LPS(60 μg·ml-1)及恩诺沙星(20 μg·ml-1)+LPS(30 μg·ml-)联合处理致肝细胞损伤程度适宜,为最佳致肝细胞损伤剂量,且二者合用有一定的协同致肝损伤效应.恩诺沙星是常用的动物专用氟喹诺酮类,其应用过程中促进细菌内毒素释放,以上结果提示二者共存,提高了临床鸡肝损伤症状的发生率.
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