【摘 要】
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目的 构建靶向新生隐球菌MIS1基因的siRNA重组表达载体质粒，并进行鉴定.方法 根据GenBank的MIS1基因序列，按照载体要求设计单链引物，克隆到空载体psilencer4.1-CMV neo中，经
【出 处】
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2012全国中西医结合皮肤性病学术会议
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目的 构建靶向新生隐球菌MIS1基因的siRNA重组表达载体质粒，并进行鉴定.方法 根据GenBank的MIS1基因序列，按照载体要求设计单链引物，克隆到空载体psilencer4.1-CMV neo中，经过LiAc化学法将重组质粒转染到新生隐球菌细胞中并用G418筛选，利用real time PCR鉴定阳性细胞的MIS1基因水平.结果 重组表达质粒Psilencer4.1-CMV-siMIS1经PCR、双酶切及测序鉴定，结果证明重组表达载体构建成功，其能在mRNA水平显著抑制MIS1的表达.结论 已成功构建新生隐球菌MIS1基因的siRNA表达载体，为深入研究MIsl在隐球菌相关疾病的发生及发展中的作用提供了技术手段.
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