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目的:建立羊驼毛囊干细胞的分离和培养方法。方法:先用0.25％的胰酶和0.02％的EDTA分离得到单个毛囊，利用0.2％的中性蛋白酶消化获得毛囊干细胞，采用“两步酶”消化法进行细胞培养，倒置显微镜观察细胞形态，培养各代细胞。结果:两步酶法可培养出毛囊干细胞，并可传代培养。结论:两步酶法适合羊驼毛囊干细胞的体外培养，该方法的建立为毛囊干细胞的相关实验奠定了基础。