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目的原核表达并纯化结核分枝杆菌MPT83蛋白,并分析其细胞免疫学特性,同时建立间接ELISA方法用于牛结核病临床检测,评价其应用潜能。方法构建MPT83蛋白的重组表达菌,诱导纯化并鉴定产物,FACS和ELISPOT方法分析其细胞免疫学特性,建立间接ELISA方法,检测临床采集的奶牛血样,评价其用于牛结核病血清学检测的能力。结果SDS—PAGE分析表明,诱导后在约30kDa处出现新条带,与目的蛋白理论分子量相符,纯化产物纯度达98%,浓度为629μg/mL,且具有与抗H37Rv多抗血清的特异的免疫反应性;蛋白免疫小鼠脾脏CD4+和CD8+T细胞表面CD69表达水平均显著升高,且CD4+T细胞活化程度显著高于CD8+T细胞,而脾细胞分泌IFN—γ的能力显著低于IL-4;应用ELIsA方法检测临床样品214份,与γ-干扰素试验结果符合率分别为25.2%(阳性)和97.8%(阴性)。结论MPT83蛋白高效可溶性表达,并初步用于牛结核病血清学临床检检测。