【摘 要】
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目的 为深入探索Rtn4-A/B基因的生物学功能,拟制备Rtn4-A/B基因敲除小鼠.方法 采用RED/ET克隆方法,使用细菌人工染色体(BAC)载体构建Rtn4-A/B基因打靶载体并使其线性化,通过电转化法将其转入129小鼠胚胎干细胞(ES细胞).将正确同源重组的ES细胞注射入C57BL/6J小鼠囊胚腔,繁育出嵌合体小鼠后,进一步繁殖以获得杂合子小鼠.抽提小鼠尾尖组织DNA,采用PCR法鉴定小鼠
【机 构】
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第二军医大学长海医院呼吸内科 200433
【出 处】
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中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议
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目的 为深入探索Rtn4-A/B基因的生物学功能,拟制备Rtn4-A/B基因敲除小鼠.方法 采用RED/ET克隆方法,使用细菌人工染色体(BAC)载体构建Rtn4-A/B基因打靶载体并使其线性化,通过电转化法将其转入129小鼠胚胎干细胞(ES细胞).将正确同源重组的ES细胞注射入C57BL/6J小鼠囊胚腔,繁育出嵌合体小鼠后,进一步繁殖以获得杂合子小鼠.抽提小鼠尾尖组织DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型.
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