生防菌在植株上的定殖能力是决定其生防能力发挥的关键因素,与细菌生物膜形成密切相关。研究生物膜形成相关基因并明确其在定殖中的功能,有助于明确生防菌的作用机理。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)9407是本实验室从苹果上分离获得的有益细菌,在室内和田间条件下对苹果轮纹病菌具有明显的防治效果,能在苹果果实上稳定定殖,应用前景广阔。为深入研究影响该菌株生防能力的基因,明确其调控机制,本实验室成功构建了B.subtilis 9407 TnYLB-1转座子随机插入突变体库。本研究以B.subtilis 9407 TnYLB-1随机插入突变体库为基础材料,筛选获得生物膜形成能力发生显著变化的突变体,明确B.subtilis 9407中与生物膜形成相关的基因及其调控途径。本研究共获得32株生物膜形成能力发生显著改变的突变体,其中有14株突变体完全丧失生物膜形成能力。以TnYLB-1内部约380bp片段为模板合成探针通过Southern杂交,确定转座子插入的拷贝数;采用反向PCR克隆突变体中转座子插入位点的侧翼序列,确定转座子的插入位点。序列比对发现,转座子的插入位点分别位于17个基因内,其中参与核糖体合成4个、调控因子4个、tRNA修饰3个、分子伴侣2个、运输蛋白1个、细菌细胞代谢1个及功能未知的基因2个。这些基因的作用还需要通过基因敲除和功能互补等实验进行验证。本研究结果有助于明确B.subtilis 9407菌株生物膜形成的调控途径,为深入研究B.subtilis 9407菌株在苹果果实上的定殖机制和生防作用机理奠定了基础。