毒死蜱单克隆抗体的制备及ELISA检测方法研究

来源 :中国环境诱变剂学会风险评价专业委员会第四届第三次委员会议暨全国第11届学术会议——低碳环境与遗传损害研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:longlong2ddd
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目的:建立毒死蜱间接ELISA检测方法。 方法:以毒死蜱原药与3-巯基丙酸为起始原料,合成半抗原并对其进行结构鉴定。利用该半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备毒死蜱人工免疫抗原和包被抗原,再取已免疫的经过筛选的Balb,c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,用间接ELISA和间接竞争ELISA方法对2株细胞进行鉴定,并测定与其它农药的交叉反应率。 结果:获得两株稳定分泌毒死蜱单克隆抗体的细胞株,初步建立了毒死蜱间接EUsA检测方法,其检测范围为0.04-0.42μg/mL,半数抑制浓度(IC50)为0.135μg/mL,最低检测限为0.03μg/mL,与杀螟硫磷、对硫磷和马拉硫磷几乎没有交叉反应。 结论:成功制备两株分泌毒死蜱抗体的单克隆细胞株,初步建立了毒死蜱间接ELISA检测方法。
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