一种新的人ND4基因腺相关病毒的构建和检测

来源 :中国眼底病论坛暨第十五届全国眼底病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:QQ38216943352177
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目的 构建一种新的人ND4基因腺相关病毒,可用于研究Leber遗传性视神经病变的基因治疗.方法 人工合成一种新的人正常ND4基因,构建rAAV2/2-ND4重组腺相关病毒,进行纯化与浓缩后,用特异扩增ND4基因的引物进行聚合酶链反应(PCR)鉴定,用地高辛标记的H1探针点杂交方法检测病毒液中rAAV2/2-ND4的物理滴度.利用免疫荧光检测ND4是否可以在线粒体中表达.
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目的 研究Cardiotrophin-1 (CT-1)对S334转基因视网膜变性大鼠视锥光感受器细胞的保护作用.方法 选择出生20 d的纯合子S334转基因大鼠,左眼行玻璃体腔内注入CT-1 (10 μg/5 μL PBS),右眼玻璃体腔内注入5 μL PBS作为对照.注射10d后CO2处死大鼠,PBS行心脏灌注,取出眼球,去除角膜、虹膜、晶体及撕除巩膜和脉络膜,光感受器面朝上,行全视网膜铺片,用
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目的 观察川芎嗪(TMP)对氯化钴(CoCl2)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)缺氧模型中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 原代培养HUVECs与鉴定.HUVECs分为对照组、150μmol/L CoCl2缺氧组与50、100、200 μmol/L TMP药物处理组.CoCl2干预HUVECs 4 h造模,再加入不同浓度的TMP继续培养8h后,分别提取
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目的 视网膜水肿是视网膜缺血再灌注损伤的早期并发症之一,通常会导致不可逆的视功能损伤.本研究旨在研究缺血再灌注损伤时地奥司明对减轻视网膜水肿的作用及其机制.方法 通过眼前房加压灌注调节大鼠眼压至110 mm Hg(11 mm Hg=0.133 kPa)并持续60 min,制作视网膜缺血再灌注损伤模型.
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目的 探讨氨基胍(AG)对氧诱导的小鼠视网膜病变视网膜神经细胞的保护作用.方法 7d龄C57BL/6J小鼠80只随机分成4组:正常组,高氧组,高氧生理盐水组,AG治疗组,每组20只.正常组放在空气中饲养,其余三组分别放于氧浓度为750 ml/L的氧箱中饲养5d后放于正常空气中饲养至17d.AG治疗组于第7d开始腹腔注射AG(1 00 mg/kg),1次/d,直至17d,高氧生理盐水组注射等量的生理
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目的 氧化损伤诱导视网膜神经胶质(Müller)细胞功能下降和凋亡被认为可能是老年性黄斑变性(AMD)的发病机制之一.最近研究表明,促红细胞生成素(EPO)是一种具有抗氧化、抗细胞凋亡、神经营养作用等多种生物学效应的细胞因子.本研究目的为探讨EPO是否可以抑制氧化损伤导致的Müller细胞凋亡及其分子机制.
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目的 在以前研究中,我们发现大麻素CB1受体可以保护视网膜色素上皮细胞(RPE)免受氧化伤害.我们采用小干扰(siRNA)方法敲低CB1受体或其拮抗剂AM251利用在过氧化氢(H2O2)诱导的人视网膜色素上皮细胞株(ARPE-19)上进一步研究RPE细胞的作用.方法 先把ARPE-19细胞和CBI siRNA-E or CB1拮抗剂AM251孵育2h,然后暴露于H2O2下24 h.采用MTT、DC
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目的 研究氧致视网膜病变形态学和氧化应激反应的早期改变,以及17β-雌二醇对这些改变的作用.方法 出生后第7天C57BL/6J小鼠放入高氧环境中(75%±2%)饲养5d,然后在正常氧环境中饲养3d,并从第7天开始每日皮下注射17β-雌二醇.第9天视网膜铺片,第9、13、14天测定视网膜丙二醛和血管内皮生长因子(VEGF)含量,NADPH氧化酶含量和活性.
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目的 本课题组的前期研究发现机械应力(MS)能促进人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19细胞株)分泌胶原,同时也显著影响RPE的糖代谢,但具体机制尚不明确.糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)是糖代谢中的关键酶,与皮肤纤维细胞的胶原合成相关,但是否涉及RPE的胶原合成则尚无报道.本研究拟采用双向调节实验、光学二次谐波成像技术(SHG)和代谢组学等研究方法明确GSB-3β在MS诱导RPE胶原合成中的作用
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目的 通过观察高糖诱导人视网膜血管内皮细胞(HRECs)胞核中乙酰肝素酶(Heparanase,Hpa)、血管内皮生长因子(VEGF)和RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ,PolⅡ)的表达分布,并探讨在高糖诱导视网膜病变中Hpa对VEGF基因转录调控的作用.
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目的 观察玻璃体腔重复注射抗血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体bevacizumab(商品名Avastin)后对糖尿病大鼠视网膜的毒性作用.方法 40只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成正常组(A组)和糖尿病组,分别为10、30只.采用链脲佐菌霉素(STZ)尾静脉注射方法制作糖尿病大鼠模型.
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