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MicroRNA(miRNA),一类非编码小RNA,作为新的逆境调控因子越来越引起人们的关注.低温是限制作物生产力及物种分布的一个重要环境因子,低温下会诱导抗寒相关miRNA 的产生,其作用是通过引导靶基因mRNA 的降解和阻止翻译过程来调控靶基因的表达,最终导致植物形态上、生理上的变化,而对寒胁迫做出响应.东北农业大学培育的自主知识产权的冬小麦新品种“东农冬麦1号”(dn1)是首例能在黑龙江省高寒地区越冬(返青率85％以上)的强抗寒(可耐-30℃低温)栽培品种.近来,许多物种中已鉴定了许多抗寒相关miRNAs,但对于dn1中抗寒miRNAs 的研究较少.本研究通过实验室前期构建冬小麦抗寒miRNA 库为基础,挑选出抗寒相关 18 个家族的21 条miRNAs.应用psRNATarget 在线程序预测20 条miRNAs 对应的196 个靶基因,其中有与抗寒相关转录因子或与胁迫响应相关蛋白.而后筛选5 条丰度较高且表达差异显著的miRNAs：miR169、miR 172、miR 319、miR 397 和miR 5218.分别于0℃、-10℃、-25℃下,应用茎环荧光定量PCR 验证上述miRNAs 及其靶基因的表达：-10℃下miR169、miR172、miR319,miR5218 表达量显著降低,miR397 表达量升高.而-25℃,miR169、miR172、miR319 和miR397 表达量显著升高,miR5218 表达量显著下降；-10℃下miR169 靶基因,miR319 靶基因表达量下降,miR172、miR397 和miR5218 靶基因表达量上升.-25℃下,miR169 和miR319 靶基因的表达量显著升高,miR172、miR397 和miR5218 靶基因表达量显著下降.结果表明筛选的5 个miRNAs 及其靶基因响应低温胁迫,且miR169 及miR319 对其靶基因呈负调控,分析与dn1的强抗寒性相关.本研究为开展东农冬麦1 号寒胁迫响应miRNA 的调控下,dn1强抗寒的分子机制的研究奠定基础.