稻曲病菌中稻绿核菌素合成基因簇的初步研究

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稻曲病已成为我国水稻生产上的三大病害之一。该病的症状是在稻穗上形成体积数倍于稻粒的稻曲球,造成严重的减产。此外,稻曲球中含有大量对人畜有害的毒素,其中包括一类有色的吡喃酮的衍生物——稻绿核菌素。目前,在稻绿核菌素的分离、鉴定以及生物活性的测定方面取得了重要进展。但是,对稻曲病菌中稻绿核菌素的生物合成途径及其调控机理尚不明确。本研究对通过生物信息学预测的稻绿核菌素生物合成基因簇进行了初步功能鉴定。首先,基于同源重组的正负向筛选敲除体系以及农杆菌介导转化法获得了稻曲病菌P1菌株的UV2080、UV 2083、UV 2086、UV2090和UV2091等5个基因的敲除突变体;其次,对这些基因敲除体进行生长表型和毒素合成能力的测定,发现△UV2086、△UV2090和△UV2091丧失了稻绿核菌素的合成能力,但在△UV2080和△V2083中仍能检测到稻绿核菌素。△UV2083较野生型菌株生长速率显著增加;△UV2086相较于野生型菌株在固体培养基上颜色明显变浅,而△UVV2080、△UV2083、△U2090和△UV2091菌株颜色相对于野生型菌株有不同程度的变化,推测可能是该毒素生物合成过程中积累了有色的中间产物。后续将对稻绿核菌素的生物合成路径以及合成基因的表达调控进行深入研究。
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