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目的:探讨miR-29a调控效应靶基因TET在结肠炎相关结肠癌(CAC)发病进程中的分子机制及其与IL-6/STAT3的相关性,并研究救必应有效成分长梗冬青苷的干预机制。方法:采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)方法建立C57BL/6小鼠CAC模型,miRCURY LNATM miRNAs芯片检测对照组和CAC模型小鼠结肠组织中miRNAs的差异表达,筛选差异miRNAs并在临床患者及模型动物样品中采用RT-PCR进行验证;RT-PCR检测TET1、TET2、TET3 mRNA的表达;免疫荧光测定模型动物结肠组织和结肠上皮细胞体系中5-hmc和TET1的表达;蛋白印迹检测TET3、STAT3和P-STAT3蛋白的表达水平;MTT检测长梗冬青苷对肿瘤细胞增殖的作用。结果:采用AOM/DSS复制C57BL/6小鼠CAC模型,病理显示小鼠结肠粘膜呈中、重度异型增生且伴随大量炎细胞的浸润;miRNAs测序结果表明CAC小鼠结肠组织中miR-29a的表达明显升高,经RT-PCR验证发现,CAC小鼠结肠组织、人结肠癌(手术样本)结肠组织及HCT-116细胞中,miR-29a的表达均明显高于正常组。CAC小鼠和人结肠癌组织中,STAT3、P-STAT3蛋白表达水平均显著升高,而TET3mRNA和TET3蛋白的表达水平降低,免疫荧光显示CAC小鼠结肠粘膜5-hmc和TET1的表达低于正常组。在体外研究发现,HCT-116、IEC-6、RAW264.7转染miR-29a precursor使其高表达后,STAT3蛋白表达增加,TET3mRNA表达下降(IEC-6和HCT-116),TET3蛋白表达减少(HCT116),5-hmc和TET1表达降低(IEC-6和HCT-116)。转染miR-29a inhibitor,结肠细胞中STAT3蛋白表达降低,TET3mRNA表达升高。IL-6 (50 ng/ml)刺激结肠上皮细胞24h,TET1、TET2、TET3mRNA降低,STAT3蛋白表达增加。IL-6 (50ng/ml)刺激24h可增加细胞mi R-29a水平,而STAT3inhibitor逆转IL-6引起的HCT-116细胞中miR-29a的升高。长梗冬青苷降低CAC小鼠结肠组织中miR-29a水平和STAT3蛋白的表达,增加TET3蛋白的表达;体外抑制HCT-116的增殖,逆转HCT-116细胞中miR-29a precursor引起的STAT3蛋白和上调及TET3蛋白表达的下降。结论:miR-29a/STAT3可能在CAC进程中形成了正反馈:miR-29a激活了IL-6/STAT3信号通路,使STAT3蛋白和P-STAT3蛋白表达增加,同时,IL-6/STAT3进一步诱导巨噬细胞及结肠上皮细胞中miR-29a的表达,加剧抑制TET3mRNA和TET3蛋白表达,miR-29a/STAT3互相作用放大了炎症效应,从而参与结肠炎-癌的发生过程。长梗冬青苷的干预作用可能与其抑制miR-29a/STAT3中关键分子有关。