蛋白质依赖于其稳定的球状结构发挥正常的生物功能。然而在某些条件下,其结构会发生展开并错误折叠^1,2,其中最被广泛研究的即为蛋白质纤维化。它由大量分子间β-sheet沿着纤维轴生长而构成。这一结构被ThT荧光光谱以及CD光谱所证实,其细长纤维样的形貌也被AFM技术所证实。这一刚性有序的结构被认为与神经退行性疾病有着密切的联系,如阿尔兹海默病,帕金森症等^3,4。尽管这一结构变化过程被普遍接受,但是关于其微观层次的分子结构变化以及其特征时间一直以来都没有明确结论。本文以溶菌酶蛋白为模型⁵,利用拉曼光谱同时对其纤维化过程中三级结构以及二级结构的变化进行了观测。我们采用1340-1360cm^-1范围Trp侧链残基的吲哚环伸缩振动表征蛋白质三级结构的变化,927cm^-1范围N-C_α-C基团以及1650cm^-1范围AmideⅠ基团的拉曼光谱指针表征蛋白质二级结构的变化。结合ThT荧光光谱以及AFM图谱,我们定量分析了微观结构以及宏观结构的变化,从而得到溶菌酶蛋白纤维化过程的反应历程及主要中间状态的特征时间:溶菌酶纤维化过程中,其三级结构首先变化,形成部分展开态,随后二级结构中α-helix在10h左右开始减少,而β-sheet则在40h左右开始大量增多,最终在160h左右纤维样达到饱和,这说明α-helix结构可能并不是直接转化为β-sheet结构,而是优先转化为random coil结构。