论文部分内容阅读
为了构建小鼠pMSV-Slfn5-GFP基因重组表达质粒构建及基因结构分析，提取了小鼠肝脏组织中总RNA,反转录为cDNA.PCR扩增小鼠Slfn5编码序列片断,并与pGEM-T Easy载体连接,连接产物转化到大肠杆菌DH5α中.挑取阳性克隆提取质粒,经限制性内切酶HpaⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定.酶切鉴定正确的质粒送Macrogen USA测序.测序正确的质粒通过HindⅢ和XhoⅠ与pMSV-GFP连接,并命名为pMSV-Slfn5-GFP.通过UCSC分析小鼠Slfn5及其家族基因组结构,并通过NCBI确定了Slfn5的蛋白结构域.成功构建小鼠pMSV-S1fn5-GFP全长基因表达载体，S1fn5的AAA_4蛋白结构域由phylogeny.fr确定了该结构在Slfn蛋白家族中的保守性。