2-OG对Anabaena PCC 7210转录因子NtcA与启动子结合能力影响的结构分析

来源 :华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yao080803
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  蓝细菌(Anabaena PCC7210)中的NtcA是属于cAMP受体蛋白(CAP)家族的一个转录因子。在本文将NtcA克隆入博T28含组氨酸标签的表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中与分子伴侣共表达。经过亲和层析和和凝胶过滤法纯化得到纯度高于95%的均一性蛋白质,浓缩后在有无α-酮戊二酸(2-OG)加入的条件下结晶,希望能利用X射线衍射得到晶体数据,通过解析,从结构的角度解释2-OG使NtcA发生了怎样的构象变化,提高了其与DNA的结合能力。现已得到无2-OG条件下的单晶和纯化蛋白与1mM2-OG共混的晶体,并在晶体优化中。
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