【摘 要】
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目的食管癌是常见的恶性肿瘤之一,我国是食管鳞癌的高发区,其早期诊断的临床方法十分有限,目前关于食管鳞癌的发病机制仍不清楚。长链非编码RNA是一类长度大于200nt的RNA分子
【机 构】
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北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室;
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目的食管癌是常见的恶性肿瘤之一,我国是食管鳞癌的高发区,其早期诊断的临床方法十分有限,目前关于食管鳞癌的发病机制仍不清楚。长链非编码RNA是一类长度大于200nt的RNA分子,它们参与基因转录、RNA剪切、细胞增殖分化等各项生命活动,其在肿瘤的发生发展中也发挥着重要作用。本课题旨在探究非编码RNA linc-w在食管鳞癌发生发展中的功能。方法 Real-time检测目的基因在食管鳞癌细胞中的表达情况;核浆分提和PCR检测目的基因的细胞定位;RACE实验获得基因的序列信息;Northern实验验证各剪切体的表达丰度;siRNA降低目的基因的表达,克隆形成和生长曲线实验观察其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化。结果核浆分提和PCR实验表明目的基因主要定位在细胞核;RACE实验表明目的基因可能存在四种剪切形式,其中2.9k的剪切体表达丰度较高;敲降目的基因后,细胞的生长减缓,克隆形成能力减弱,且细胞对顺铂处理更敏感,凋亡的细胞数增加。结论目前的实验结果表明目的基因是一个核定位基因,其在食管鳞癌的细胞生长和凋亡中发挥着重要作用。
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